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T4 DNA连接酶(2000U/μL)图片
产品货号:
CZ037
中文名称:
T4 DNA连接酶(2000U/μL)
英文名称:
产品规格:
10万U|50万U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
产品简介:
T4 DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下,可催化双链DNA或RNA上的5’-磷酸末端和3’-羟基末端之间形成磷酸二酯键,可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应,也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。
单位定义:
在20 μL 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中,6 μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟,50%的DNA片段被连接所需的酶量定义为1个活性单位。
失活或抑制:
65℃加热10分钟可使T4 DNA连接酶失活。
产品特点:
高纯度,确保该产品具有最高的活性和纯度,无核酸酶、外切酶、RNA酶、外源DNA/RNA等污染。
操作说明:
1.在冰浴条件下,将下列反应液加入无菌、无核酸酶微量离心管中:
组分 加入体积
10× Reaction Buffer a 2 μL
载体DNA(4 kb) 50 ng(0.02 pmol)
插入DNA(1 kb)b 37.5 ng(0.06 pmol)
无核酸酶dH2O 加至19 μL
T4 DNA连接酶(T4 DNA Ligase)c 1 μL
总体积 20 μL
a.10×Reaction Buffer需于室温下解冻后混匀。
b.插入DNA的加入量需为载体DNA的3倍摩尔量。
c.T4 DNA连接酶需最后加入反应体系中。
2.使用移液器轻柔吹打均匀后,短速离心;
3.对于黏性末端,可于16℃孵育过夜或室温孵育10分钟;对于平末端或单碱基突出片段,则可于16℃孵育过夜或室温孵育2小时;
4.置于65℃加热10分钟,使酶失活;
5.冰浴冷却后,取1~5 μL反应液转化至50 μL感受态细胞中。
相关搜索:T4 DNA连接酶(2000U/μL)
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